Odgovori na strokovna vprašanja ultrafiltracije Centrifugalna cev
1. Kaj je membranski material ultrafiltracije cevi?
Polietersulfonska membrana ima jasno in natančno prestrezanje molekularne mase, stabilne fizikalne in kemijske lastnosti, izjemno nizko adsorpcijo beljakovin in visoko predelavo izdelkov
2. Če je treba ločiti beljakovine z različnimi molekulskimi utežmi, koliko razlike potrebuje molekularna teža beljakovin?
Beljakovini morata biti 10-krat ali več različnih velikosti.
3. Ali se lahko ultrafiltracijo centrifuga cev uporablja za koncentracijo virusa?
Ultrafiltracijo centrifuga cev lahko koncentrira virus večkrat ali celo visoko. Imamo posebno membrano za virus. Različni virusi morajo izbrati ustrezno membrano pore velikost
4. Ali je lahko ultrafiltracijo centrifuga cev razkužena in odporna na alkalne?
Lahko ga razkužimo s 75% etanol avouous raztopino. Naš material lahko prenese 0,1-0,5n natrijev hidroksid alkalno priranje
5. Ali se lahko ultrafiltracijo centrifuga cev uporablja za visokotlačno sterilizacijo
Imamo posebno ultrafiltracijo centrifug cev primerna za visokotlačno sterilizacijo
6. Glede na stabilnost beljakovin, lahko ultrafiltracijo cev centrifugiranje pri nizki temperaturi?
Da, naš material je odporen na nizko temperaturo, vendar bo čas koncentracije daljši. Hitrost filtracije membrane je povezana s temperaturo krmne tekočine
7. O stopnji izterjave
Na splošno je stopnja okrevanja topijev s koncentracijo večjo od 0,1mg/ml 90% ali več. Na splošno je izguba vzorcev posledica nespecificne adsorpcije na površini membrane filtra in površine materialne cevi. Da bi dobili visoko stopnjo okrevanja, je obdržana molekulska teža izbrane membrane filtra približno 1 / 3 ciljne beljakovine, ultrafiltracijo membrana je asimetrična membrana, njegova velikost pore je običajno porazdeljena, in lahko uhaja pod centrifugalnim visokim tlakom. V tem stanju se lahko beljakovinska tekočina deformiše, zato je manjša odperka prestrezanja, počasneje je pretok, vendar bo stopnja okrevanja višja
8. Ko je beljakovina koncentrirana, so padavine. Kako se s tem soočiti?
Če je beljakovina koncentrirana prehitro ali preveč, lahko povzroči padavine beljakovin. Končna koncentracija po koncentraciji beljakovin ne sme biti preveč visoka; Za beljakovine, ki so občutljive na stopnjo koncentracije in jih je enostavno oboriti, so predlagane metode izboljšanja naslednje:
1) Zmanjšajte centrifugalno hitrost,
2) Uporabite ultrafiltracijo membrane z večjo molekulsko maso
3) Udarite in sesajte cev za koncentracijo in nato centrifugo
9. Kateri so možni razlogi, zakaj ultrafiltracijo centrifuge cevi ni mogoče centrifugiranje navzdol?
Če ultrafiltracijo cev ni mogoče centrifugiranje, se lahko začetna centrifugacija izvede z okoli 20% vodno raztopino etanola, saj je po popolnoma sušeni ultrafiltraciji membrana šibko hidrofobna, tok pa se lahko obnovi po namočitvi z nizko površinsko napetostjo topila
10. Pravilno uporabo in ohranjanje ultrafiltracijo cevi
Ultrafiltracijo je treba pred uporabo najprej centrifugiranje s prečiščeno vodo, da se preveri njena celovitost. Po vsaki uporabi ga je treba shraniti v vmočnem stanju, da se membrani prepreči sušenje
11. Kako odstraniti endotoksin iz ultrafiltracijo cevi?
Ultrafiltracijo, ki smo jo zagotovili, nismo zdravili z endotoksin. Obenem se zaradi razširjenega obstoja endotoksinov v naravi lahko vzorci, ki zahtevajo notranje toksine, pred poskusom očistijo z 0,5N natrijevega hidroksida, nato pa očistijo z ro vodo, da odstranijo večino endotoksina
12. Ko se zgoščene beljakovine analizirajo v nadaljnjem toku, se ugotovilo, da obstajajo motnje. Kaj je razlog?
Ultrafiltracijo lahko predhodno očistite s puferjem ali prečiščeno vodo. Če interferenca še vedno obstaja, jo očistite z 0,1N natrijevega hidroksida in jo nato očistite s prečiščeno vodo
13. Med ciljno beljakovino in ultrafiltracijo v procesu koncentracije lahko pride do nespecificnega adsorpcije. Kako ga izboljšati?
Uporabljamo hidrofilno polietersulfonsko membrano, za nekatere beljakovine s posebnimi lastnostmi pa se lahko poveča njihova nespecifični adsorpcija z membrano. V tem primeru lahko poskusimo pred ultrafiltracijo pred poskusom, ali pa se obrnemo na našega inženirja
14. Po koncentraciji se ugotovilo, da v koncentratu ni ciljnih beljakovin. Kakšni so možni razlogi?
1) Začetna koncentracija beljakovin ne sme biti preniska. Če je koncentracija preniska, se membrana ne sme
2) Izberite ustrezno velikost membranske pore. Centrifugacija in koncentracija ultrafiltracijsko cev pripadajo filtraciji mrtve utvare. Velikost membranske pore je na splošno manjša od 2-krat ali več ciljnih beljakovin
3) Izberite ustrezno centrifugalno hitrost
4) Ali ciljne beljakovine padavine
