Način vzdrževanja in uporabe ultrafiltracijske cevi

Način vzdrževanja in uporabe ultrafiltracijske cevi

Funkcija ultrafiltracijske cevi:

1) Koncentracija; 2) razsoljevanje; 3) Zamenjajte pufer; 4) Ima učinek delnega čiščenja.

1. Nova ultrafiltracijska cev se lahko uporablja neposredno brez druge obdelave;

2. Ultrafiltracijske cevi ni mogoče sterilizirati pri visoki temperaturi;

3. Obdelava ultrafiltracijske cevi pri menjavi koncentriranega proteina

Ultrafiltracijska cev se lahko ponovno uporabi. Namočite ga v 0.1M NaOH za 1-2 uri, sperite z vodo in nato 3-krat sperite z ustrezno raztopino (sterilizirana voda ali PBS) na centrifugi, ki jo lahko uporabite za koncentriranje novih beljakovin;

4. Obdelava normalno nameščene ultrafiltracijske cevi

Za pogosto uporabljeno ultrafiltracijsko cev jo namočite v 0.1M NaOH za 1-2 uri, sperite z vodo in namočite v sterilizirano vodo. Poskrbite, da bo membrana filtra mokra in preprečite rast bakterij;

5. Dolgotrajna obdelava ultrafiltracijske cevi

Če ultrafiltracijske cevi ne uporabljate dlje časa, jo namočite v 0.1M NaOH za 1-2 uri, sperite z vodo in namočite v 20-odstotnem etanolu za shranjevanje. Poskrbite, da bo membrana filtra mokra in preprečite rast bakterij;

6. Centrifugalna hitrost, ki se uporablja za ultrafiltracijsko cev

Centrifugalna hitrost je običajno 4000 vrt/min (na splošno je priporočeno 3000 g, največja pa ne sme presegati 4000 g). Po centrifugiranju 5-8 minut lahko 4ml vzorec koncentriramo na manj kot 1ml do desetine mikrolitrov; Če je hitrost previsoka, bo ciljni protein odpadel, kar bo povzročilo izgubo ciljne beljakovine; Nizka hitrost, zamuda in nizka delovna učinkovitost;

7. Previdnostni ukrepi, ko glava pištole sega v ultrafiltracijsko cev

Pri dodajanju beljakovinske raztopine ali pufra v ultrafiltracijsko cev lahko uporabite modro glavo pištole; Ko pa se koncentrirani ciljni protein absorbira z dna ultrafiltracijske cevi, je treba uporabiti rumeno glavo pištole; Ko je glava pištole vstavljena v ultrafiltracijsko cev, je treba preprečiti, da bi se dotaknila filtrske membrane, da se prepreči predrtje filtrske membrane;

8. Zmanjšajte izgubo zaradi adsorpcije beljakovin ultrafiltracijske cevi

Membrana ultrafiltracijske cevi lahko adsorbira beljakovine, kar bo zmanjšalo ciljno beljakovino za približno 30 odstotkov; Da bi zmanjšali izgubo beljakovin, po absorpciji raztopine ciljne beljakovine očistite dno ultrafiltracijske cevi z beljakovinskim pufrom, da sperete večino beljakovin, ki jih adsorbira filtrska membrana, in zmanjšate izgubo ciljne beljakovine; Če je prečiščena beljakovina koncentrirana, bodite pozorni, da koncentrirana prostornina ne sme biti premajhna; Na splošno se ne glede na to, kako centrifugiramo, približno 200 µL beljakovinske raztopine zadrži na dnu;

9. Kako opredeliti okvaro ultrafiltracijske cevi

Pri normalni uporabi, ko filtrska membrana ni preluknjana, koncentrirana beljakovinska raztopina ne vsebuje beljakovin ali je količina zelo nizka (vključno s ciljno beljakovino), medtem ko prva filtrirana raztopina vsebuje ciljno beljakovino, to pomeni, da je filtrska membrana neveljavna in je treba zamenjati z novo ultrafiltracijsko cevjo.