Dejavniki, ki vplivajo na učinek odstranjevanja virusa
Dejavniki, ki vplivajo na učinek odstranjevanja virusa
Filtracija za odstranjevanje virusov lahko znatno odstrani viruse v raztopinah, njen učinek odstranjevanja pa je povezan s tem, kje poteka filtracija za odstranjevanje virusov, koncentracijo beljakovin v dovodni tekočini, filtracijski tlak, čas shranjevanja in kriokonzervacije itd.
1. Kjer poteka filtracija za odstranjevanje virusov
Filtracija za odstranjevanje virusa se lahko pojavi kjer koli v nadaljnjem čiščenju, vendar običajno poteka po inaktivaciji virusa z nizkim pH, vmesnih korakih kromatografije ali končnih korakih kromatografije. Na splošno so dejanske zahteve glede filtracije v celotnem nadaljnjem procesu zelo odvisne od tega, kje v procesu se nahaja korak filtracije virusa, saj se lahko koncentracija beljakovin, čistost in procesne količine razlikujejo.
2. Koncentracija beljakovin v krmni tekočini
Koncentracija beljakovin v vzorcu bo vplivala na pretok filtracije za odstranjevanje virusa prek interakcije med napajalno raztopino in membransko vrečko. Višja koncentracija beljakovin bo zmanjšala hitrost filtracijskega procesa odstranjevanja virusa. Povezan je tudi z lastnostmi samega proteina in same membrane. Običajno se koncentracija izdelka zmanjša med stalnim redčenjem izdelka, da se povečata zmogljivost in hitrost pretoka filtrske membrane za odstranjevanje virusov.
3. Filtrirni tlak
Postopek filtracije za odstranjevanje virusov mora na splošno zagotoviti neprekinjeno filtracijo. Ker lahko prekinitev tlaka povzroči vdor virusa. Načelo je: konvekcijski učinek napajalne tekočine, ki teče skozi filter, povzroči, da se delci virusa ujamejo na površini membrane ali ujamejo v manjše pore zaradi izključitve velikosti molekul. Ko tlak pade, se pretok in konvekcijski učinek zmanjšata. Virus bo ušel in se sprostil iz majhnih por ter se razširil v velike pore z veliko verjetnostjo, da bo prodrl.
4. Čas shranjevanja in kriokonzervacija
Nekateri proteini tvorijo agregate med procesom shranjevanja, zlasti med kriokonzervacijo. Ti agregati lahko vplivajo na filtracijo za odstranjevanje virusov. Zato je treba oceniti, ali je proizvodni proces dolgotrajno skladiščen ali kdaj je potrebna kriokonzervacija.
